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電泳緩沖液有何作用?
  • 發(fā)布日期:2024-07-15      瀏覽次數(shù):587
    • 電泳緩沖液是核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳系統(tǒng)的一個(gè)重要組成, 是電泳場中的導(dǎo)體,也是維持電泳系統(tǒng)恒定 pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。

      電泳緩沖液的作用:
      1.緩沖液在電泳過程中的一個(gè)作用是維持合適的pH。電泳時(shí)陽極與陰極都會(huì)發(fā)生電解反應(yīng),陽極發(fā)生的是氧化反應(yīng)(4OH--4e->2H2O+O2),陰極發(fā)生的是還原反應(yīng)(4H++4e->2H2),長時(shí)間的電泳將使陽極變酸,陰極變堿。一個(gè)好的緩沖系統(tǒng)應(yīng)有較強(qiáng)的緩沖能力,使溶液兩極的pH保持基本不變。

      2.電泳緩沖液的另一個(gè)作用是使溶液具有一定的導(dǎo)電性,以利于DNA分子的遷移,例如,一般電泳緩沖液中應(yīng)含有0.01-0.04mol/L的Na+離子,Na+離子的濃度太低時(shí)電泳速度變慢;太高時(shí)就會(huì)造成過大的電流使膠發(fā)熱甚至熔化。

      3.電泳緩沖液還有一個(gè)組分是EDTA,加入濃度為1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等離子,防止電泳時(shí)激活 DNA酶,此外還可防止Mg2+離子與核酸生成沉淀。

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